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光学显微镜物镜参数解读

  • 更新日期:2019-06-18      浏览次数:27075
    • 1.放大倍数:物镜上行数字中的“10”和“4”表示物镜的放大倍数为10倍或4倍,这里放大倍数不是面积的放大倍数,而是指像的长度或宽度的放大倍数,且显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积。

      2.分辨率:分辨率是指所能分辨两个物点间的小距离。显微镜的分辨距离越小,表示它的分辨率越高,也就是表示它的性能越好。显微镜的分辨率大小是由物镜的分辨率来决定的,而物镜的分辨率则由它的数值孔径(镜口率)和照明光线的波长决定的。当光线均匀地透过标本时,显微镜的分辨距离可用公式:D=0.61λ/NA(D表示物镜的分辨距离,单位nm;λ表示照明光线波长,单位nm; NA表示物镜的数值孔径) 表示,所以显微镜的分辨率与数值孔径成正比。(D值越小,分辨率越高)

      3.数值孔径( 镜口率):物镜中“0.25”和“0.10”分别为两个物镜的数值孔径,它表示物镜的前透镜收集来自样品光线的能力,数值孔径的大小可用公式NA=Nsinα,其中N表示介质的折射率,空气中N=1,而在油镜下,N 可提高到1.5;α表示物镜孔径半角( 图2) ,物镜孔径半角越大,进入物镜的光线就越多。

      4. 机械镜筒长: 图1物镜上的“160”即指该物镜必须在机械镜筒长度为160mm的显微镜上才能使用。由物镜定位面至目镜定位面的距离为160mm,该距离称为机械筒长,即取下物镜和目镜以后,所剩下的镜筒长度。各国对机械筒长的规定不同,主要有160mm、170mm 和190mm 等几种。

      5.盖玻片厚度:上规定,盖玻片的标准厚度为0.17±0.01mm。图1物镜上所标记的数字“0.17”即表明该物镜要求盖玻片的厚度为0.17mm,若盖玻片的厚度大于0.18mm时,杂光( 不是反光镜反射的光) 就会进入物镜,从而产生相差,当盖玻片的厚度小于0.16mm 时,应该进入物镜的光线不能进入物镜,进而也产生相差影响观察效果。另外,由于香柏油与玻璃的折光率相近,所以油镜物镜不存在盖玻片厚度不规范引起的相差问题,也就是说盖玻片的厚度对油镜物镜观察效果影响几乎可忽略不计,在有、无盖玻片的情况下都可以使用( 如血涂片) 。所以,有的油镜上不标“0.17”而代之以横线“-”。

      6.工作距离:工作距离也叫物距,即指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离。

      总结一下:如图,图中四个数据的含义分别是:

      ①物镜上行数字中的“10”和“4”表示物镜的放大倍数。

      ②物镜中“0.25”和“0.10”分别为两个物镜的数值孔径,即镜口率,它与显微镜的分辨率有关,数值越大分辨率越高,也就是表示它的性能越好。

      ③物镜上的“160”称为机械筒长,指物镜定位面至目镜定位面的距离为160mm,即取下物镜和目镜以后,所剩下的镜筒长度,表示该物镜必须在机械镜筒长度为160mm的显微镜上才能使用。

      ④物镜上所标记的数字“0.17”表示该物镜要求盖玻片的厚度为0.17mm。